Автор работы: Пользователь скрыл имя, 20 Сентября 2012 в 16:11, лабораторная работа
Основная цель предлагаемого лабораторного практикума – изучение теоретических основ и условий выполнения общих методов контроля содержания различных загрязняющих веществ в ряде отраслей пищевой промышленности, обоснование выбора метода анализа с учетом его метрологической характеристики, особенностей объектов исследования, аппаратурного обеспечения метода контроля, периодичности контроля и представительности анализируемой пробы. Практикум готовит также студента для выполнения лабораторных работ по специальным разделам технологии и работ научно-исследовательского характера.
В лабораторный практикум включены общие вопросы контроля безопасности продовольственного сырья и продуктов питания в соответствии с новыми стандартами и разделы, освещающие современные химические и физико-химические методы определения нитратов, нитритов, солей тяжелых металлов, консервантов, антибиотиков и афлатоксинов в продовольственном сырье и продуктах питания.
Если интенсивность флуоресценции афлатоксина В1 в экстракте выше интенсивности флуоресценции пятна стандарта, соответствующего 0,001 см3 или 6 мкл стандартного раствора (6 нг афлатоксина В1), то на пластинку следует нанести либо меньшее количество экстракта (уменьшить V6), либо разбавить раствор А смесью бензол-ацетонитрил (увеличить объем V5), внеся соответствующие коррективы в расчетную формулу.
Определение афлатоксинов В1, В2, G1 и G2 в маслах.
Экстракция.
К 15 г масла добавляют 25 см3 гексана, 5 см3 4%-го раствора хлорида натрия и 100 см3 ацетонитрила. Смесь встряхивают на аппарате для встряхивания в течение 40-50 минут, затем помещают в делительную воронку и отделяют нижний ацетонитрильный слой.
Очистка экстракта.
Ацетонитрильный экстракт обезжиривают в делительной воронке гексаном (3х50 см3), высушивают сульфатом натрия и упаривают досуха. Остаток растворяют в 2 см3 хлороформа и проводят очистку раствора с помощью колоночной хроматографии.
На колонку с 4 г силикагеля наносят хлороформный экстракт, дают хлороформу стечь и колонку промывают 100 см3 смеси хлороформ-ацетон (9:1). Элюат фильтруют через бумажный или капроновый фильтр, упаривают досуха на ротационном испарителе, остаток растворяют в 0,4 см3 хлороформа и анализируют с помощью ТСХ.
Расчет концентрации афлатоксина по методу ТСХ проводят по формуле:
С – концентрация афлатоксина в масле, мг/кг;
V1 – объем очищенного раствора экстракта в хлороформе, см3 (0,4 см3);
V2 – объем раствора экстракта, наносимый на пластинку, см3 (0,02 см3);
m – масса афлатоксина в нг в V2 см3 экстракта, оцененная по ТСХ;
М – навеска продукта, взятая для анализа, г.
Н
А
П
Р
А
В
Л
Е
Н Раствор А Раствор А
И
Е 2 10 5 20 10 15 мм
1 мкл мкл мкл мкл мкл
Рис.4. Разметка пластинки для одномерной ТСХ афлатоксинов.
1 Н А П Р А В Л Е Н И Е
Н
А 5 мкл 15 мм
П
Р
А
В
Л
Е
Н
И
Е Раствор А
2 20 мкл
2 4 6 15 мм
мкл
Рис.5. Разметка пластинки для двухмерной ТСХ афлатоксинов.
Авторы: Роева Н.Н.
Кирничная В.К.
Рецензент: Шленская Т.В.
Редактор: Свешникова Н.И.
Информация о работе Безопасность продовольственного сырья и продуктов питания