Технология получения гормона роста

Суммарный выход целевого белка после завершения всех стадий очистки составляет 44%.

Пример 6. Выделение (вариант B) и очистка (вариант 1) рекомбинантного  гормона роста человека, секретируемого штаммом дрожжей S.cerevisiae ВКПМ Y-3580

Выделение и очистку осуществляют как в примере 5, но в качестве продуцента целевого белка используют штамм S.cerevisiae ВКПМ Y-3580. Суммарный выход рекомбинантного гормона роста человека после завершения всех стадий очистки составляет 42%.

Пример 7. Выделение (вариант B) и очистка (вариант 2) рекомбинантного  гормона роста человека, секретируемого штаммом дрожжей S.cerevisiae ВКПМ Y-3506

После окончания процесса ферментации клетки дрожжей отделяют центрифугированием (30 мин при 12 об/мин). Осаждение целевого белка осуществляют путем добавления раствора ПЭГ 6000 до конечной концентрации 17%. Для этого к 100 мл супернатанта добавляют 50 мл 50%-ного раствора ПЭГ 6000 и выдерживают 30 мин при 5°С. Образовавшийся осадок отделяют центрифугированием (30 мин при 20 об/мин) и растворяют в 100 мл буфера A.

Очистку осуществляют как  в примере 3. Суммарный выход рекомбинантного  гормона роста человека после  завершения всех стадий очистки составляет 60%.

Пример 8. Выделение (вариант B) и очистка (вариант 2) рекомбинантного  гормона роста человека, секретируемого штаммом дрожжей S.cerevisiae ВКПМ Y-3580

Выделение и очистку осуществляют как в примере 7, но в качестве продуцента целевого белка используют штамм S. cerevisiae ВКПМ Y-3580. Суммарный выход рекомбинантного гормона роста человека после завершения всех стадий очистки составляет 58%.

Таким образом, заявляемый способ позволяет получить рекомбинантный гормон роста человека с выходом  до 60%, что существенно выше выхода (17%), известного для дрожжевого продуцента Pichia pastoris. [9]

4. Условия хранения соматропина

До разведения (в картридже) препарат следует хранить в холодильнике при температуре от 2°до 8°С; не замораживать. Срок годности - 3 года.

Приготовленный раствор  следует хранить в холодильнике при температуре от 2°до 8°С не более 28 дней; не замораживать. Срок годности 28 дней. Приготовленный раствор препарата может храниться при комнатной температуре не более 30 мин.

Растворитель в шприце следует хранить в холодильнике при температуре от 2°до 8°С. Срок годности - 3 года. [4] 

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Получение новых лекарств на основе рекомбинантных белков по своей  значимости для практического здравоохранения  можно сравнить с успехами Дженнера и Пастера в области вакцинации и открытием в середине XX столетия эры антибиотиков. Гетерологическая экспрессия белков наряду с расшифровкой генома человека сделала принципиально возможным создание основ для «компенсирующей», или «ингибирующей» терапии белками, закодированными в геноме и произведенными в необходимых количествах другими клетками-хозяевами. Сбылась давняя мечта врачей - получение искусственным путем с помощью генной инженерии запасных «молекулярных» частей человека. Символично, что первые практические успехи, достигнутые с помощью технологии рекомбинантных ДНК, относятся к области молекулярной эндокринологии. В 80-ые годы прошлого столетия компании Genentech первой удалось получить генно-инженерный инсулин человека в новом хозяине, прокариотической клетке кишечной палочки (Escherichia coli). [3]

Благодаря достижениям генной инженерии, мы, наконец, пришли к пониманию  того, что СТГ влияет на белковый, жировой, минеральный обмен, действует  на уровне клетки, не имея органа-мишени, и является сильнейшим анаболиком. Это дает большие перспективы  его применения для стимуляции репарационных  процессов и лечения различных  заболеваний. Гормон роста человека - самый перспективный, и безопасный, из имеющихся в арсенале современной  фармакологии препаратов, являющийся своего рода панацеей, для спортивной медецины, герантологии и косметологии. [10] 

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТРАТУРЫ

1. Овчинников Ю.А. Биоорганическая химия. -М.: Просвещение, 1987
2. Промышленная микробиология/ Под ред. Егорова Н.С. – М.: Высшая школа. - 1989
3. http://heliopharm.ru/poluchenie-gormona-rosta-cheloveka
4. Исаева И.В., Ковалева C.B., Пешая T.B. и др. Инсулин, его аналоги и лекарственные средства // Ведомости научного центра экспертизы государственного контроля лекарственных средств.- 2001,- № 2
5. Березин И.В., Яцимирский А.К. Биотехнология и ее перспективы. Серия «Биология» № 11. – М.: Знание. – 1986
6. http://www.bulanoff.ru/sport_library/klats.html
7. Патрушев Л.И. Искусственные генетические системы. Генная и белковая инженерия. -М.: Наука. 2004
8. Егоров Н.С. Биотехнология. Проблемы и перспективы. – М.: Высшая школа. – 1987
9. Коробко В.Г., Болдырева Е.Ф., Шингарова Л.Н. и др. Патент РФ, № RU 2144958, 2000г
10. Воробьев И.И., Пономаренко Н.А., Габибов А.Г., Баирамашвили Д.И., Дурова О.М., Шустер A.M. Высокоэффективный метод получения гормона роста человека.: Сборник тезисов VIII чтений, посвященных памяти академика Ю.А.Овчинникова