Характеристика нейроиммунного взаимодействия у больных ревматоидным артритом

Таблица 9

Сравнительный характеристика CD4⁺ и CD8⁺  лимфоцитов в зависимости от содержания внутриклеточных цитокинов больных РА и здоровых женщин группы 2 («амбидекстры1»)

 Примечание: M±m;

Пациенты  второй группы  «амбидекстры 1» относительно здоровых женщин второй группы, характеризовались аналогичными общей группе изменениями Т1 и Т2 лимфоцитов: значимым снижением всех субпопуляций, кроме «наивных» CD4⁺ и CD8⁺ лимфоцитов с двойной экспрессией цитокинов (таблица 9).                                                                                                                  

Таблица 10

Сравнительный характеристика CD4⁺ и CD8⁺  лимфоцитов в зависимости от содержания внутриклеточных цитокинов больных РА и здоровых женщин группы 3 («амбидекстры2»)

 Примечание: M±m;

В процессе определения  характера влияния нейромедиаторов на Т1 и Т2 лимфоциты общей группы больных РА было установлено зависящее от дозы влияние ацетилхолина на Т - клетки с двойной экспрессией IFN_Y/IL-4. Так, определен стимулирующий эффект ацетилхолина в дозе (1·10^-10М) на содержание Тх0 - CD4⁺(IFN_Y/IL-4)⁺ (р=0,017) и выраженная тенденция к подавлению популяции цитотоксических нулевых Т-клеток  -  CD8⁺(IFN_Y/IL-4)⁺ ацетилхолином в дозе 1·10^-7М (р=0,07). В то же время, инкубация активированных мононуклеаров с адреналином в (1·10^-4М)  достоверно снижает содержание IFN_Y ⁺ клеток в обеих Т - клеточных субпопуляциях и IL-4⁺ клеток среди CD4⁺ лимфоцитов. Таким образом, определен модулирующий эффект нейромедиаторов на внутриклеточную продукцию цитокинов Т- лимфоцитами. 

На следующем  этапе работы исследовались молекулярно-генетические особенности Т – лимфоцитов больных РА и здоровых женщин с различной ФМА. В частности, при сравнении длины теломерных  районов ДНК иммунокомпетентных клеток были установлены значимые различия в гранулоцитах между группами здоровых людей,  различающихся по характеру ФМА - гр.1=7851,1±384,1; гр.2=8032,6±287; гр.3=9230,2±375; р=0,02(гр1-3); р=0,04(гр.2-3).

Сравнение длины теломерных районов ДНК в иммунокомпетентных клетках  больных РА между собой не выявило различий ни в одной из исследуемых клеточных популяций,  невзирая на то, что  больные РА женщины с различной ФМА значимо различались по возрасту. Следует отметить, что в группе больных нами установлена корреляционная зависимость не только между возрастом и длиной теломерных районов ДНК в лимфоцитах (r=-0,43; p=0,006), но и значимая отрицательная зависимость с длительностью заболевания (r=-0,33; p=0,046).

При сравнении общих групп больных РА и здоровых доноров получены результаты, подтверждающие литературные данные об укорочении у больных теломерных участков ДНК в иммунокомпетентных клетках. При сравнении больных РА с группами здоровых в зависимости от ФМА были получены данные, свидетельствующие об укорочении длины теломерных участков ДНК в клетках больных РА 1 и 3 групп относительно  групп здоровых доноров с аналогичной асимметрией (таблица 11). В группе 2 статистически достоверных различий длины теломерных районов ДНК в иммунокомпетентных клетках больных РА и здоровых доноров не было установлено, что может быть связано с активностью СО ВНС в этой группе, медиаторы которой активируют теломеразу (Elissa S. Epel., Jue Lin., Firdaus S. Dhabhar et al., 2009), а также с протективным действием пролактина (Krishnan N., e.a. 2003). 

                                                                                                                                Таблица 11

Сравнение длины теломерных районов ДНК  иммунокомпетентных клеток больных РА и здоровых доноров в зависимости от ФМА

Примечание: Единицы  измерения - пары нуклеотид; M±m;

Клинические проявления заболевания (суставной синдром) у больных РА оценивался при поступлении в стационар и при выписке по следующим показателям: ЧБС (число болезненных суставов), ЧПС (число припухших суставов), ВАШ (визуальная аналоговая шкала), DAS 28, СОЭ (скорость оседания эритроцитов). Не было обнаружено достоверных различий по этим признакам между группами при поступлении больных РА в стационар и при выписке.

Согласно индексу DAS28, позволяющему оценить не только эффективность лечения, но и текущий уровень активности процесса, все пациенты, независимо от ФМА имели высокую активность болезни и достоверно не различались по параметрам суставного синдрома между анализируемыми группами. В результате проведенного лечения группы также не различались между собой по отдельным показателям суставного синдрома. При этом динамика суставного синдрома в отдельных группах была различной (таблица 12).

Таблица 12

 Динамика суставного синдрома в группах больных РА в зависимости от ФМА

Примечание: M±SD – средняя ± стандартное отклонение;

Так, хороший  эффект на терапию получен в группе 3 (с преимущественно доминантным  правым полушарием): индекс DAS28 снизился на 1,42, при выписке составлял 4,84. В группе 2 (с активностью обоих полушарий) получен удовлетворительный эффект на терапию: индекс DAS28 снизился на 1,35, но при выписке в среднем по группе равнялся 5,33. В группе 1 (у пациентов с доминантным левым полушарием) эффекта на терапию не было – за время лечения DAS28 снизился на 1,06 и составил в среднем по группе 5,4. Таким образом, установлен зависящий от ФМА эффект на стандартный курс лечения, свидетельствующий об эффективности применяемого лечения у пациентов с активностью обоих полушарий и отсутствии выраженного эффекта у пациентов с доминантным левым полушарием.

Резюмируя результаты работы, можно сказать, что больных РА женщин характеризует сочетанное изменение иммунной и нервной систем, связанное с особенностями ФМА и определяющее клинико-иммунологическую разнородность РА, что свидетельствует о роли межсистемного взаимодействия в патогенезе заболевания.

ВЫВОДЫ

1. Больных РА относительно здоровых женщин характеризует сопряженное изменение психологических, иммунологических и функциональных параметров: снижение функциональной активности нервной системы, дисбаланс Т – клеточного звена, активация В – клеточного эвена и нарушение функций моноцитарно-макрофагального звена иммунной системы. У больных определена связь всех исследуемых характеристик с активностью отделов ВНС и зависимость указанной активности от функциональной межполушарной асимметрии, что свидетельствует о значимой роли ВНС и ФМА в межсистемном взаимодействии при ревматоидном артрите.
2. Иммунную систему больных РА женщин-«правшей» 1 группы характеризует нарушение экспрессии активационных маркеров и повышение апоптоза CD8⁺  Т- клеток, сопровождающееся выраженным дефицитом CD8⁺ CD45RO⁺ - лимфоцитов и сдвигом соотношения Т- клеточных субпопуляций в сторону CD4⁺ CD45RO⁺ - клеток, а также дефицит Т-клеток 2 типа. Нарушения процессов пролиферации и дифференцировки Т-звена иммунной системы, изменение функциональной активности нервной системы (снижение памяти, «способности к обучению», силы и подвижности возбудительных и рост инерционных процессов), а также неудовлетворительный (по показателям суставного синдрома) эффект лечения обострения, свидетельствуют о варианте течения РА, связанном с доминантностью левого полушария мозга.
3. Больных РА женщин 2 группы  «амбидекстры 1», характеризуют нарушения в обеих Т - клеточных субпопуляциях: увеличение содержания  CD4⁺ лимфоцитов не несущих маркеры активации и дефицит как активированных, так и не активированных CD8⁺ - лимфоцитов. Функциональная  активность Т – клеток обусловлена снижением дифференцированных Т-лимфоцитов 1 и 2 типа и повышением недифференцированных CD4⁺ и CD8⁺ лимфоцитов с двойной экспрессией цитокинов. Умеренное снижение функциональной активности нервной системы, особенности нарушений Т-клеточного звена, активация гуморального звена, а также отсутствие  отличий от здоровых по длине теломерных районов ДНК в ИКК, были сопряжены с удовлетворительным результатом терапии обострения и свидетельствуют о варианте течения РА, обусловленном активностью обоих полушарий  мозга.
4. Больных РА 3 группы «амбидекстры 2» характеризует нарушение процессов пролиферации, связанное с  дефицитом Т- клеток, экспрессирующих поздние маркеры активации и повышенным апоптозом CD4⁺ лимфоцитов, что сопряжено со сдвигом баланса Т- клеточных субпопуляций в сторону CD8⁺ CD45RO⁺- клеток и дефицитом CD4⁺ CD45RO⁺ - лимфоцитов, а также с нарушением дифференцировки Т - клеток, приводящее к дефициту Т- клеток 1 типа. Выявленные изменения были связаны с особенностями клинического течения (ранний дебют) и хорошим эффектом терапии обострения, что свидетельствует о варианте течения РА, связанном с доминантностью преимущественно правого полушария.
5. Больных РА женщин характеризует дисбаланс метаболических и нейровегетативных функций ВНС, зависящий от ФМА. На фоне снижения трофотропных и эрготропных функции ВНС -  умеренная парасимпатикотония в первой группе, симпатикотония во второй и преимущественно гуморально-метаболическая активность в третьей группе. Влияние ацетилхолина и адреналина in vitro на лимфоциты больных РА разных групп зависит не только от нейромедиатора и его дозы, но и от фенотипа Т - клеток. Если воздействие на CD4⁺ клетки оказывает зависящее от ФМА модулирующее влияние, то CD8⁺ - лимфоциты, дефицит, которых установлен у всех больных РА женщин, не отвечают активацией процессов пролиферации и дифференцировки. В отличие от больных, группы здоровых женщин имеют минимальные различия по вегетативному обеспечению, а Т - лимфоциты здоровых людей устойчивы к  воздействию физиологических концентраций нейромедиаторов in vitro. Полученные данные свидетельствует об участии ВНС в патогенезе РА, а также о недостаточной эффективности механизмов регулирующего влияния со стороны нейроэндокринной системы на ИКК при РА.
6. У больных РА женщин особенности  функциональной активности мозга на уровне ВНД, типологических свойств нервной системы и  отделов ВНС, а также фенотипические, функциональные и генетические характеристики Т - клеточного звена иммунной системы зависят от характера ФМА и определяют клинико-иммунологическую разнородность заболевания.