Анаплазмозно-бабезиозная инвазия овец в ЧП с.Новоселовское, Раздольненского района АР Крым

1.2. Эпизоотология и патогенез анаплазмозно-бабезиозной инвазии у овец.

При изучении эпизоотологии  бабезиоза было установлено, что  к нему восприимчивы овцы и козы всех пород и возрастов, но тяжелее заболевание переносят взрослые животные старше 2 лет. При паразитировании возбудителей у собак и свиней более тяжелое течение регистрируют у поросят в возрасте 2-4 месяцев и щенят [25].

Основным переносчиком бабезиоза собак является клещ Dermacentor pictus [37,13,17]. Dermacentor pictus встречается в лесах, особенно расположенных около водоемов. Прокормителями для этого вища клещей являются грызуны, насекомоядные, домашние и дикие животные. Пик активности клещей приходится на май и осенний период [23].

К анаплазмозу восприимчивы кроме мелкого и крупного рогатого скота, также буйволы, олени, лоси, сайгаки, козероги, белохвостые олени [16].

Источником возбудителя  анаплазмоза и бабезиоза являются больные животные и носители [16, 25].

Основными переносчиками  анаплазм и бабезий являются иксодовые  клещи на разных стадиях развития. Механически переносить анаплазм также могут кровососущие насекомые и работники животноводсва, главным образом ветеринарные врачи при использовании нестерильных инструментов, загрязненных кровью больных животных или анаплазмоносителей [34, 25].

Анаплазмоз и бабезиоз - заболевания сезонные. У крупного рогатого скота вспышки заболеваний регистрируют в пастбищный (июнь-июль, октябрь) и стойловый (при анаплазмозе - январь-март) периоды. У овец массовая заболеваемость связана с периодом активности членистоногих (весна, лето, осень) [16,25].

Появление кровепаразитарных  заболеваний тесно связано с  ареалом распространения иксодовых  клещей. В степном Крыму на овцах  паразитируют четыре вида клещей: Rhipicephalus bursa, Haemaphysalis punctata, Hyalomma plumbeum и H.scupense. Причем, согласно данным исследователей, превалирует здесь клещ  Hyalomma plumbeum. В предгорье обнаружено также четыре вида иксодовых клещей: Rhipicephalus bursa, Haemaphysalis punctata, Hyalomma plumbeum и Dermacentor marginatus, из которых основным является Rhipicephalus bursa. В горной зоне АР Крым зарегистрировано  наличие пяти видов клещей: Rhipicephalus bursa, Haemaphysalis punctata, Hyalomma plumbeum, Ixodes ricinus  и Dermacentor marginatus, из которых широко распространены Rhipicephalus bursa, Haemaphysalis punctata и Hyalomma plumbeum [10,9]. Также переносчиком южных гемоспоридиозных заболеваний крупного рогатого скота является клещ Боофилюс калькаратус [20].

Главным переносчиком кровепаразитарных болезней овец в Крыму, как свидетельствуют данные литературы, является двуххозяинный клещ  Rhipicephalus bursa [10 ].

Результаты  изучения динамики паразитирования клещей вида Rhipicephalus bursa на овцах в АР Крым показали, что сезон нападения клещей на животных длится в зависимости от климатических факторов (температуры и количества осадков) со второй декады апреля или второй декады мая по ноябрь. При этом заклещеванность небольшая – в среднем 1,5 экземпляра на одно животное, а экстенсивность инвазии – 50-60 %. В апреле и мае число поражённых животных увеличивается и достигает максимума в средине июня. В это время заклещеванность овец в среднем составляет до 30 экземпляров клещей на одном животном со 100% экстенсивностью инвазии. Именно в этот период наблюдается массовое клиническое проявление бабезиоза и анаплазмоза у овец. В июле пораженность овец снижается, а в августе, сентябре, октябре и ноябре обнаруживают единичные случаи паразитирования имаго клещей на животных. В сентябре заклещеванность овец резко возрастает за счет личиночных и нимфальных стадий. В это время на овцах выявляли до двадцати экземпляров личинок клещей [10,26].

Патогенез анаплазмозно-бабезиозной  инвазии.

После укуса  клеща возбудитель проникает  в капилляры и в эритроциты [3]. Процесс фагоцитоза в месте внедрения возбудителя начинается уже в 1-е сутки после заражения. Паразит распространяется по кровеносной и лимфатической системе и через 48-72 часа развивается генерализованный процесс, что ведет к изменению биохимических структур тканей и развитию благоприятных условий для размножения возбудителя. Имеются сообщения о способности клеток крови фагоцитировать бабезии и эритроциты, пораженные ими [19]. 

В эритроцитах происходит размножение бабезий и анаплазм. При этом отмечается лизис эритроцитов, который обусловлен не только воздействием паразитов, но и появлением антиэритроцитарных антител [3,4].

Клинические проявления заболевания возникают когда число пораженных эритроцитов достигает 3-5%.  При разрушении эритроцитов в кровь попадают продукты жизнедеятельности паразитов и гетерогенные протеины, что обусловливает мощную пирогенную реакцию и другие общетоксические проявления. Нарастающая анемия сопровождается выраженной тканевой гипоксией и нарушениями микроциркуляции. В почечных капиллярах оседают клеточные оболочки («тени») эритроцитов и свободный гемоглобин, что приводит к развитию гемоглобинурии и острой почечной недостаточности. При массивном лизисе эритроцитов развиваются нарушения пигментного обмена с накоплением в крови преимущественно непрямого билирубина. Всё это приводит к истощению и гибели животного [3, 15, 43].

1.3. Клинические признаки заболевания и его лабораторная диагностика

При бабезиозе  инкубационный период составляет от 8 до 18 дней. Больные животные угнетены, отказываются от корма, у некоторых замечена мышечная дрожь. Дыхание поверхностное, учащенное, пульс ускорен. Появляется лихорадка постоянного типа, температура тела достигает +42 ⁰С. При тяжелом течении болезни животное лежит или передвигается с трудом. У больных наблюдается сильная жажда. Цвет слизистых оболочек бледный, с желтушным оттенком. У животных наблюдается чередование поноса и запора. Моча имеет красный цвет (гемоглобинурия) [ 42,8].

Количество  эритроцитов в крови снижается до 4-5 млн. в 1 мм³, гемоглобина – на 20-30 % вследствие быстрого разрушения эритроцитов из-за размножения в них паразитов. Переболевание овец длится 4-9 дней. При благоприятном исходе больные овцы выздоравливают медленно [10]. Бабезиоз также ведет к изменению количества белка и соотношения белковых фракций в сыворотке крови [6].

У больных животных при бабезиозе отмечают кратковременное снижение в крови содержания Т- и В-лимфоцитов [3].

У собак при  бабезиозе наблюдали полное изменение форм эритроцитов- пойкилоцитоз. Основными формами эритроцитов являлись акантоциты, стоматоциты, шизоциты и их периферическая вакуолизация [14].

При анаплазмозе  инкубационный период  колеблется от 8 до 40 дней. Температура держится в пределах +40 - +41⁰С в течение от одного до пяти – восьми дней, затем наступает ремиссия до пяти дней. В последующем температура вновь повышается, что совпадает с появлением в крови небольшого количества паразитов. Болезнь длится 15-40 дней. Гибель чаще наступает на 3-8 день [10, 2, 43].

При тяжелом  течении заболевания быстро наступает общее угнетение, слабость, вялость мышц. Животные, несмотря на наличие аппетита, худеют, подолгу лежат. Основным патогномоничным симптомом при анаплазмозе является выраженная анемия. Цвет слизистых оболочек бледный, во время повышения температуры появляется желтушность, затем она исчезает, а сильная бледность («фарфоровые слизистые») остается еще длительное время (1-1,5 месяца).У животных сильно увеличиваются и твердеют лимфоузлы (в 2-3 раза). Восстановление лимфатических узлов до нормы происходит через 2-4 месяца после переболевания [16 ].

Во время  болезни наблюдается учащенное  сердцебиение, аритмия, тахипноэ. Желудочно-кишечный тракт находится в состоянии атонии. В начале болезни наблюдаются запоры, которые сменяются поносами. У больных животных сильная жажда. Цвет мочи светло-желтый или почти бесцветный. Кровь водянистая, количество эритроцитов снижается до 1-3 млн. в 1мм³, лейкоцитов до 3-4 тыс. в 1 мм³, в крови преобладают большие и малые лимфоциты при общем угнетении кроветворения. На протяжении 18 месяцев носительства анаплазмы сохраняют свою патогенность [10].

Диагноз на кровепаразитарные заболевания овец и других животных ставят на основании эпизоотологических наблюдений, клинических и патананатомических исследований, а также обязательного микроскопического исследования мазков крови и мазков-отпечатков из паренхиматозных органов павших животных [10, 4, 16].

Кровь для исследований берут из краевой вены уха. Для мазка стараются использовать первую каплю крови, так как в ней содержится максимальное количество паразитов. Мазки окрашивают методом Романовского-Гимза.

За последние  годы сотрудниками Крымской опытной  станции для диагностики кровепаразитарных  заболеваний овец был апробирован  и применен метод люминесцентной микроскопии. Наличие высококачественных люминесцентных микроскопов, синтез и изготовление высококачественных флюорохромов сделало возможным применение люминесцентного анализа для разработки более эффективных приемов диагностики. Накопленный опыт применения люминесцентной микроскопии как медицинскими, так и ветеринарными специалистами, указывает на значительные преимущества этого метода, которые складываются из контрастности изображения, быстроты и несложности выполнения, высокой чувствительности, цветности изображения и специфичности [10 ].

Морфологически  в окрашенных по Романовскому-Гимза препаратах не всегда можно с достоверностью определить видовую принадлежность паразита. Особую трудность в микроскопической диагностике представляют анаплазмы, которые часто необходимо отличать от телец Жоли и базофильной зернистости эритроцитов.

При использовании  люминесцентного метода мазки из крови готовят общепринятыми  методами. Фиксацию производят метиловым  спиртом, но допускается использование  ацетона, 1-5%-ного нейтрального формалина. Окрашивают мазки акридиновым оранжевым  в разведении 1:1000 на 0,1н HCl, время экспозиции 1-3 минуты. Просмотр препаратов проводят на люминесцентном микроскопе.

Anaplasma ovis в препаратах из крови больных животных после окраски акридиновым оранжевым светится ярким золотисто-зеленым цветом, не наблюдается каких-либо выступов или «хвостов», однако паразиты крупнее, чем в препаратах окрашенных по Романовскому.

У Babesia ovis при окрашивании акридиновым оранжевым цвет свечения меняется в зависимости от времени экспозиции. При окрашивании в течение 10-30 секунд ядро приобретает зеленоватый цвет, а протоплазма – оранжевый. При экспозиции 1-5 минут весь паразит светится ярким золотисто-оранжевым цветом [ 10].

Таким образом метод люминесцентной микроскопии для исследовательских и диагностических целей при кровепаразитарных заболеваниях овец является наиболее точным и эффективным.

Для более полного  определения эпизоотической ситуации по кровепаразитарным заболеваниям используют также исследование клещей на зараженность пироплазмидами.

Шабанов А.М. использовал цитохимический метод (НСТ тест), который использовался как рутинный гематологический тест для определения резистентности организма. С развитием патологического процесса от момента заражения происходит активация внутриклеточных ферментных систем. У больных животных уменьшается содержание в крови эозинофилов, лимфоцитов (максимально к 5-м суткам) и увеличивается полиморфомоноцитоз, полинуклеароз. Отмечается выраженная реакция на патологический процесс со стороны моноцитарной системы как по морфологическим, так и по цитохимическим показателям [39].

При постановке диагноза у людей используют реакцию непрямой иммунофлюоресценции. Диагностический титр при однократном исследовании не менее 1:256. Применяют также реакцию связывания комплемента.

При невысокой  паразитемии иногда используют биологический метод, при котором кровь больного вводят спленэктомированным животным. Спустя 2-4 недели у животных развивается заболевание и бабезии легко выявляются в мазке крови [3].

1.4. Лечебно-профилактические мероприятия при анаплазмозно-бабезиозной инвазии овец

До настоящего времени остается неясным, насколько  продолжителен иммунитет при  гемоспоридиозах и как долго  сохраняется возбудитель в организме  переболевших животных. Известно, что  по характеру иммунитета гемоспоридиозы относятся к таким заболеваниям, при которых после острого приступа болезни, если животные выздоравливают, вырабатывается нестерильный иммунитет. Поскольку организм в данном случае остается зараженным, он легко переносит новое инвазирование тем же возбудителем. Если же организм освобождается от паразита, то он становится восприимчивым к повторному заражению. Следовательно, при гемоспоридиозах иммунитет существует до тех пор, пока длится инвазия, и затухает вместе с ней. Такой иммунитет был назван Сержаном еще в 1924 году «премуницией». Учитывая данную особенность было предложено предохранять животных от гемоспоридиозов использованием живых вакцин [18].

Наряду с  вакцинацией используется противоклещевая обработка животных в сочетании с химиопрофилактикой [5]. Для химиотерапии и химиопрофилактики предложен ряд препаратов, которые способствуют или препятствуют сохранению иммунитета против кровепаразитов.

Исследователи изучали влияние азидина, диамидина и гемоспоридина на иммунитет при экспериментальном бабезиозе и пироплазмозе овец. В результате чего установили, что при использовании азидина у овец, больных   бабезиозом и пироплазмозом, стойкий иммунитет не формируется - при повторном заражении спустя 25-90 дней почти все животные вновь заболевают. Возможно, под воздействием азидина бабезии и пироплазмы утрачивают инвазированность и не обеспечивают напряженного иммунитета, хотя препарат антителообразования не подавляет [ 26].

При применении диамидина устойчивого иммунитета больные животные не приобретали - при  повторном заражении спустя 25-90 дней после введения диамидина почти все овцы вновь заболевали. Вероятно, диамидин, подавляя развитие бабезий и пироплазм, препятствует выработке активного иммунитета [26 ].

А при лечении  гемоспоридином у овец, больных бабезиозом и пироплазмозом, образуется достаточный иммунитет, обеспечивающий устойчивость животных к повторному (через 25-90 дней) заражению. Гемоспоридин не освобождает организм от бабезий и не изменяет нормального течения иммунно-биологических процессов, происходящих в организме больных овец [5].

При изучение эффективности  противопротозойных препаратов в комбинации с пролонгаторами было установлено, что комбинации противопротозойных препаратов азидин в дозе 0,0035 г/кг и беренил-гранулят- 0,005 г/кг с пролонгаторами (пепсин и поливиниловый спирт – 2% растворы и аэросил 2 г на животное) не дают стойкого профилактико-лечебного эффекта, особенно если преобладает анаплазмозная инвазия. При преобладании в крови анаплазм (до 81%), наиболее эффективным среди общепринятых схем лечения протозойных инвазий есть препарат окси-100, который необходимо вводить двукратно с интервалом в 21 суток в дозе 0,15 см³/кг живой массы.