Экспресс-анализ лекарственного препарата аптечного изготовления

           Лат.:  Dimedrolum

           МНН: Diphenhydramini Hydrochloridum

            Химическое название: бета-Диметиламиноэтилового эфира бензгидрола гидрохлорид

 

 

 

 

 

          C  H  NO*HCl                                                                 M. в. 291,82 [1]

 

Описание [2]. Белый мелкокристаллический порошок, без запаха или с едва уловимым запахом, горького вкуса, вызывает на языке чувство онемения. Гигроскопичен.

 

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте и хлороформе, очень мало растворим в эфире и бензоле. [2]

 

Физико-химические свойства. ЛВ поглощает свет в УФ- и ИК- областях спектра за счет хромофорных групп. За счет неподеленной пары третичного атома азота ЛВ проявляет сильные основные свойства, а за счет простой эфирной группы подвергается гидролизу. [7]

 

Методы определения  подлинности. [2]

1. определяют температуру плавления ЛВ ( 166-170’C) методом 1. Под температурой плавления подразумевают интервал температуры между началом плавления – появлением первых капель жидкости и концом плавления – полным превращением вещества в жидкое состояние.

Методика определения. Тонко измельченное вещество предварительно сушат в вакуум-эксикаторе над серной кислотой в течение 24 часов или при температуре 100-105С в течение 2 часов. Высушенное вещество помещают в капиллярную трубку. Имеющую диаметр 0,9-1,2 мм, длину 6-8 см и толщину стенки 0,1-0,15 мм, запаянную с одного конца. Для уплотнения вещества капилляр многократно бросают в стеклянную трубку высотой 80 см, поставленную вертикально на стекло, или уплотняют с помощью капиллярной палочки. Высота слоя вещества в капиллярной трубке должна быть 3-4 см.

Капиллярную трубку с веществом  сохраняют до начала определения в эксикаторе.

Во внутреннюю пробирку прибора  помещают термометр так, чтобы конец  его отстоял от дна пробирки на 1 см. нагревание проводят сначала быстро, а затем регулируют его так, чтобы  к моменту плавления была достигнута необходимая скорость подъема температуры, указанная ниже.

За 10’С до ожидаемого начала плавления капиллярную трубку с веществом вносят в прибор, опуская ее на нитке или другим каким-либо способом, например, быстро вынув термометр, прикрепляют к нему капиллярную трубку с веществом с помощью резинового колечка или тонкой проволоки и снова вносят в прибор. Капилляр помещают таким образом. Чтобы запаянный конец его находился на уровне середины ртутного шарика термометра.

Продолжают нагревание. Проводят не менее двух определений; за температуру плавления принимают несколько определений, проведенных в одинаковых условиях и отличающихся друг от друга не более чем на 1’С.

2. Инструментальные методы:
• Снимают ИК- спектр в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см по положению полос должен соответствовать рисунку спектра димедрола, приведенным в ГФ 12 издания. Метод основан на способности ЛВ поглощать монохроматический свет в ИК- области спектра.
• Снимают УФ- спектр ЛВ (0,05 % спиртовой раствор субстанции в области от 230 до 350 нм). Метод основан на способности ЛВ поглощать монохроматический свет в УФ- области спектра. Должны наблюдаться максимумы при 253 нм, 258 нм и 264 нм и минимумы при 244 нм, 255 нм, 263 нм.
3. Проводят реакции подлинности.
• Реакция образования оксониевой соли под действием концентрированной серной кислоты (ФС). Метод основан на способности ЛВ, имеющих третичный атом азота и простую эфирную группу вступать в реакцию солеобразования. Продукт реакции – оксониевая соль, объясняет появление ярко-желтого окрашивания, постепенно переходящее в кирпично-красное, от прибавления нескольких капель воды окраска исчезает, т.к. соль разрушается.

 

 

 

 

 

 

 

• Реакция кислотного гидролиза (ФС) – основана на способности ЛВ, имеющих простую эфирную группу, гидролизоваться в кислой среде. При кипячении  образуется осадок – бензгидрол. Осадок отделяют, перекристаллизовывают и определяют температуру плавления.

 

 

 

 

 

 

 

• Реакция с концентрированными серной и азотной кислотами (реактив Эрдмана). Основана на способности ЛВ, являющимися азотистыми основаниями, вступать в реакции окрашивания с концентрированными кислотами. Серная кислота выступает в качестве водоотнимающего реагента, а азотная кислота – окислителя. Наблюдается красное окрашивание. При охлаждении и добавлении воды окраска раствора переходит в коричневую, желтую и затем в оранжевую. При взбалтывании полученного раствора с хлороформом хлороформный слой окрашивается в фиолетовый цвет. (ФС)
• Реакция с сульфатом меди и роданидом аммония. Протекает по типу ионного обмена. Основана на способности ЛВ, содержащих третичную алифатическую аминогруппу, вступать в реакцию соле- и комплексообразования. Эффект реакции: коричневый осадок. [6]

 

 

 

 

 

 

 

• Реакция с общеалкалоидными реактивами ( оеактив Драгендорфа, реактив Майера, реактив Фреде, пикриновая кислота и др. ).  Реакция основана на способности ЛВ, имеющих в структуре третичный алифатический атом азота, осаждаться ощеалкалоидными реактивами. Эффект реакции: осадки различных цветов.[7]

 

 

 

 

 

 

 

• Реакция осаждения серебра нитратом. Основана на способности хлорид-иона осаждаться серебра нитратом в азотнокислой среде. Эффект реакции: белый творожистый осадок, растворимый в растворе аммония гидроксида. [7]

 

 

 

 

 

 

Чистота [2].

1. Прозрачность и цветность водного раствора (сравнивают соответственно с эталоном 1 и эталоном BY6)
2. рН (показатель кислотности должен находиться в пределах 5,0 – 6,5).
3. Посторонние примеси. Определение проводят одним из методов:
• Метод ТСХ. Суммарное содержание примесей оценивают по величине и интенсивности окраски пятен на хроматограмме по сравнению с пятнами на хроматограмме раствора сравнения (суммарное содержание посторонних примесей не должно превышать 1%).
• Метод ВЭЖХ. Площадь пика любой посторонней площади на хроматограмме испытуемого раствора должна быть не более площади пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5%).
4. потеря в массе при высушивании (не должна превышать 0,5%)
5. сульфатная зола и тяжелые металлы
6. остаточные органические растворители
7. бактериальные эндотоксины (для субстанций, предназначенных для изготовления инъекционных растворов)
8. микробиологическая чистота

 

 

 

 

Количественное  определение.

1. кислотно-основное титрование в среде протогенного растворителя (ФС). Метод основан на солеобразовании слабого органического основания с титрантом в среде протогенного растворителя, усиливающего основные свойства анализируемого вещества.

Титрант: раствор кислоты  хлорной (НСIO ).

Индикатор: кристаллический фиолетовый (в точке эквивалентности наблюдается зеленое окрашивание раствора)

Параллельно проводят контрольный  опыт.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

2. Лаурилсульфатный метод. Метод основан на реакции солеобразования (ионного обмена) между ЛВ, содержащим третичный атом азота, и лаурилсульфатом натрия. Проводится вариантом двухфазного титрования: образующийся в процессе титрования продукт реакции экстрагирует в хлороформ.

Титрант: раствор натрия лаурилсульфата (                                 )

Индикатор: диметиловый желтый (в точке эквивалентности происходит изменение окраски хлороформного слоя из желтой в красную). [7]

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

3. Алкалиметрический метод нейтрализации (вытеснения). Метод основан на слабых кислотных свойствах солей ЛВ, имеющий третичный атом азота.

Титрант: раствор натрия гидроксида (NaOH)

Индикатор: фенофталеин (интервал рН окраски 8,2-10,0)

Титруют в присутствии  органического растворителя, который  понижает ионизацию аминов, извлекает образующееся основание и смещает равновесие реакции вправо. [7]

 

 

 

 

 

 

 

 

 

4. Йодхлорметрический метод. [7] Основан на образовании комплексного соединения димедрола с йодмонохлоридом. Применяют вариант обратного титрования.

Титранты: раствор йодмонохлорида (ICI), раствор натрия тиосульфата

(               ).

Индикатор: крахмал.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

5. Меркуриметрия.[7] Метод основан на свойстве галогенид-ионов количественно взаимодействовать с солями ртути (II) с образованием труднодиссоциируемых (малоионизированных) галогенидов ртути (II). Применяют вариант прямого титрования.

Титрант: ртути (II) нитрат (                   ), ртути перхлорат (                    ).

Среда: азотнокислая.

Индикатор: дифенилкарбазон.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

6.  Аргентометрия.[6] Метод основан на свойстве галогенид-ионов количественно осаждаться серебра нитратом в виде галогенидов серебра.
• Вариант Фаянса (прямое титрование)

Титрант: раствор серебра  нитрата (                 )

Индикатор: бромфеноловый  синий, флуоресцеин.

Среда: уксуснокислая (разб.                         )

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

• Вариант Фольгарда (обратное титрование)

Титрант: раствор серебра  нитрата (                ) и аммония тиоцианата (роданида)

Индикатор: железоаммониевые квасцы (ЖАК).

Среда: кислая (разб. НNOз) – для предотвращения гидролиза соли Fe (III) (индикатора).

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

7. Сектрофотометрический метод в УФ-области спектра (ФС). Метод основан на способности ЛВ поглощать монохроматический свет в УФ-области спектра. Метод применяют для препаратов заводского производства. Расчет проводят по величине оптической плотности РСО.  [1]

 

 

 

 

 

 

Доказательство  подлинности ЛП. [4]

Цинка сульфат.

1. Реакция осаждения раствором ферроцианида калия – основана на способности ионов цинка осаждаться раствором ферроцианида калия с образованием белого студенистого осадка гексацианоферрата (II) цинка калия, нерастворимого в разведенной соляной кислоте.

Методика. К 2 – 3 каплям раствора прибавляют 2 – 3 капли раствора калия  ферроцианида.

 

 

 

 

 

2. Реакция осаждения  с раствором бария хлорида  (ФС) – основан на способности сульфат ионов осаждаться с раствором бария хлорида в кислой среде с образованием белого осадка сульфата бария, нерастворимого в разведенных кислотах.

Методика. К 1 – 2 каплям раствора прибавляют 1 – 2 капли оаствора бария  хлорида.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Кислота борная.

1. Реакция этерификации (ФС) – основана на способности  кислоты борной  с этиловым  спиртом образовывать  борно-этиловый  эфир, горящий пламенем, окаймленным зеленым цветом.

Методика. Выпаривают 5 – 6 капель раствора на водяной бане.  К сухому остатку прибавляют 1 – 2 мл 96% этанола и поджигают. Спиртовый раствор горит пламенем с зеленой каймой.

 

 

 

 

 

2.Реакция с пирокатехиновым фиолетовым – основана на кислотных свойствах кислоты борной.

Методика. К 2 – 3 каплям раствора прибавляют 0,5 мл воды , 2 – 3 капли раствора пирокатехинового фиолетового и 1 – 2 капли аммиачного буферного раствора. Появляется красное окрашивание (в контроле – сине-фиолетовое).

3. Реакция с фенофталеином в щелочной среде – основана на кислотных свойствах вещества.

Методика. К 2 – 5 каплям раствора прибавляют 1 – 2 капли раствора фенофталеина и 4 – 6 капель 0,1 моль/л раствора натрия гидроксида. Появляется ярко-розовое окрашивание, исчезающее после добавления 0,5 – 1 мл глицерина или 40 – 50 % раствора глюкозы.

 

Димедрол.

 

Реакция образования оксониевой соли под действием концентрированной серной кислоты. Метод основан на способности ЛВ, имеющих третичный атом азота и простую эфирную группу вступать в реакцию солеобразования. Продукт реакции – оксониевая соль, объясняет появление ярко-желтого окрашивания, постепенно переходящее в кирпично-красное, от прибавления нескольких капель воды окраска исчезает, т.к. соль разрушается.

Методика. Выпаривают 2 – 3 капли раствора на водяной бане. После охлаждения к сухому остатку  прибавляют 2 – 3 капли концентрированной серной кислоты. Появляется желтое окрашивание, исчезающее при добавлении 2 – 3 капель воды.

 

 

 

 

 

 

 

 

Методы количественного  определения действующих веществ. [4]

Цинка сульфат.

Комплексонометрический  метод (ФС) (прямое титрование) – основан на свойстве катиона цинка образовывать с трилоном Б водорастворимые, прочные, бесцветные, внутрикомплексные соединения. В основе метода лежит реакция комплексообразования:

 

 

 

 

 

 

В качестве индикатора используют металлоиндикатор – кислотный хром черный специальный (коэффициент устойчивости                     ). Титруют раствором трилона Б до синего окрашивания. В точке эквивалентности переход окраски объясняется наличием свободного индикатора.