Белки

Осаждение белков методом высаливания применяется для разделения белковых смесей, а также позволяет сконцентрировать белки. Седиментационный анализ (центрифугирование) позволяет фракционировать белковые смеси по значению константы седиментации отдельных белков, измеряемой в сведбергах (S). Чтобы выделить необходимый белок или белки на основе таких свойств, как молекулярная масса, заряд и аффинность, затем используются различные виды хроматографии. Кроме того, белки могут быть выделены в соответствии с их зарядом с использованием электрофокусирования.

Чтобы упростить процесс очистки белков, часто используется генетическая инженерия, которая позволяет создать производные белков, удобные для очистки, не затрагивая их структуры или активности. «Метки», представляющие собой небольшие аминокислотные последовательности, например, цепочку из 6 и более остатков гистидина, и прикрепляются к одному из концов белка. Когда экстракт клеток, синтезировавших «меченый» белок пропускается через хроматографическую колонку, содержащую ионы никеля, гистидин связывается никелем и остается на колонке, в то время как остальные компоненты лизата беспрепятственно проходят сквозь колонку (никель-хелатная хроматография). Множество других меток было разработано, чтобы помочь исследователям выделить специфические белки из сложных смесей чаще всего методом аффинной хроматографии.

Степень очистки белка можно определить, если известны его молекулярная масса и изоэлектрическая точка — с помощью различных видов гель -электрофореза — или измерения ферментативной активности, если белок является ферментом. Масс-спектрометия позволяет идентифицировать выделенный белок по его молекулярной массе и массе его фрагментов.

Для определения количества белка в образце используют ряд методик:  
биуретовый метод; 
микробиуретовый метод; 
метод Бредфорда; 
метод Лоури; 
спектрофотометрический метод.

Протеомика

Совокупность белков клетки называется протеомом, его изучение — протеомикой, названной по аналогии с геномикой. Основные экспериментальные методы протеомики включают:

• 2D-электрофорез, который позволяет разделять многокомпонентные белковые смеси;
• масс-спектрометрию, которая позволяет идентифицировать белки по массе составляющих их пептидов с высокой пропускной способностью;
• белковые микрочипы, которые позволяют одновременно измерять содержание большого количества белков в клетке;
• дрожжевую двугибридную систему (англ.)русск., которая позволяет систематически изучать белок-белковые взаимодействия.

Совокупность всех биологически значимых взаимодействий белков в клетке называется интерактомом. Систематическое исследование структуры белков, представляющих все возможные типы третичных структур, называется структурной геномикой.

Литература

Альбертс Б., Брей Д., Льюис Дж. и др. Молекулярная биология клетки. В 3 томах. — М.: Мир, 1994

Ленинджер А. Основы биохимии. В 3 томах. — М.: Мир, 1985.

Страйер Л. Биохимия. В 3 томах. — М.: Мир, 1984.

Макареня А.А. Повторим химию. М.: Высшая школа, 1989;Колтун М. 

Мир химии. М.: Детская литература, 1988; 
Книга для чтения по органической химии. Сост. П.Ф.Буцкус. М.: Просвещение, 1985; 
Чертков И.Н. Эксперимент по полимерам в средней школе. М.: Просвещение, 1971; 
Кузовая Т.В., Калякина Е.А. Белки. «Химия» (Издательский дом «Первое сентября»), 2003, 
Беляев Д.К., Воронцов Н.Н., Дымишц Г.М. и др. Общая биология. М.: Просвещение, 1999.

 

 

 

 

 

 

 

 

МБОУ СОШ №2

 

Реферат

Тема: Белки

 

 

 

 

 

Написал Гончаров Николай 11 «Б»

 

 

Проверил

 

Город Новосибирск 2014 г.